產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià)(元) |
FS0014-10MG | Bialaphos-Sodium 雙丙氨膦鈉鹽(抗生素) | 10MG | 435.00 |
FS0014-50MG | Bialaphos-Sodium 雙丙氨膦鈉鹽(抗生素) | 50MG | 1350.00 |
FS0014-100MG | 100MG | 1800.00 |
雙丙氨膦(Bialaphos,也稱(chēng)為Bilanafos)是由幾種土壤鏈霉菌代謝產(chǎn)生的一種天然有機(jī)磷三肽抗生素,結(jié)構(gòu)上由兩個(gè)L-丙氨酸殘基和一個(gè)谷氨酸類(lèi)似物草丁膦(phosphinothricin,PPT;也稱(chēng)為glufosinate)組成。一旦進(jìn)入正常細(xì)胞(不含抗性基因),其內(nèi)的肽酶水解雙丙氨膦,釋放草丁膦化合物,從而抑制正常氮代謝和導(dǎo)致胞內(nèi)氨累積,破壞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)相關(guān)的各種代謝活動(dòng),zui終殺死細(xì)胞。雙丙氨膦不僅是一種廣譜除草劑,還能強(qiáng)效抑制革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌、和一些真菌類(lèi)植物 病原菌生長(zhǎng)。
產(chǎn)品應(yīng)用:
植物基因工程研究(篩選標(biāo)志)作用機(jī)理:雙丙氨膦可用在許多植物物種(包括小麥,大麥,黑麥,燕麥,水稻和玉米)的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),用來(lái)篩選含bar基因(from Streptomyces hygroscopicus)或pat基因(from Streptomyces viridochromeogenes)的轉(zhuǎn)基因工程細(xì)胞系,這兩種基因都能編碼草丁膦N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(phosphinothricin N-acetyltransferase),使其轉(zhuǎn)化成為一種無(wú)GS抑制活性的化合物,從而使得細(xì)胞對(duì)雙丙氨膦和草丁膦產(chǎn)生抗性。轉(zhuǎn)基因玉米研究,雙丙氨膦比草銨膦的活性更強(qiáng);轉(zhuǎn)基因小麥研究,雙丙氨膦是zui可靠的選擇標(biāo)準(zhǔn);酵母基因工程中,雙丙氨膦逐漸成為重要的選擇標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品屬性:
CAS:71048-99-2
同義名:2S-amino-4-(hydroxymethylphosphinyl)butanoyl-L-alanyl-L-alanine, monosodium salt; SF-1293;
分子式:C11H21N3O6P·Na
分子量:345.26 g/mol
外觀(guān):白色或淺棕色結(jié)晶性粉末
純度:≥95%
溶解性:溶于水(10mg/ml)
化學(xué)結(jié)構(gòu)式:
應(yīng)用案例【轉(zhuǎn)基因的小麥幼胚/愈傷組織篩選】(僅作參考):
1)使用草銨膦(PPT)或雙丙氨膦進(jìn)行轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選;
2)粒子轟擊(bombardment)后將未成熟幼胚逐個(gè)轉(zhuǎn)移到E3培養(yǎng)基,維持培養(yǎng)7-14天;
3)胚胎轉(zhuǎn)移到含5µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的MSCB5培養(yǎng)基(*輪篩選用培養(yǎng)基),黑暗培養(yǎng)2周;于這2周內(nèi)不能正常生長(zhǎng)的愈傷組織直接扔棄。
4)用解剖刀將在MSCB5培養(yǎng)基上增殖的細(xì)胞簇解離,亞克隆,轉(zhuǎn)移到含有10 µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的MSCB10培養(yǎng)基,維持培養(yǎng)4周。
5)在含5µg/ml或10µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的培養(yǎng)基上篩選過(guò)程的持續(xù)周期約為50-75天。將所有培養(yǎng)物放到植物生長(zhǎng)培養(yǎng)箱內(nèi),設(shè)置25 °C,黑暗培養(yǎng)。每一個(gè)轉(zhuǎn)基因愈傷組織在含有篩選標(biāo)志的培養(yǎng)基上zui終生長(zhǎng)為大量的胚性愈傷組織。
6)設(shè)置1-10µg/ml PPT(或雙丙氨膦)的梯度濃度來(lái)測(cè)試未轉(zhuǎn)化愈傷組織,以建立更加有效的篩選系統(tǒng)。每一次實(shí)驗(yàn)大概準(zhǔn)備20個(gè)目標(biāo)培養(yǎng)平板。2個(gè)為對(duì)照,1個(gè)在N6C1上生長(zhǎng)以監(jiān)測(cè)培養(yǎng)物的健康情況,另1個(gè)在含5-10µg/ml雙丙氨膦的N6C1上生長(zhǎng)以驗(yàn)證未轉(zhuǎn)化細(xì)胞對(duì)選擇標(biāo)志的反應(yīng)。
【注意】:轉(zhuǎn)基因小麥愈傷組織的選擇實(shí)驗(yàn)中雙丙氨膦是有效的篩選標(biāo)志,然而雙丙氨膦不能殺死未轉(zhuǎn)化細(xì)胞。為了得到理想的篩選效果,建議低密度(大概每個(gè)平板上10個(gè)未成熟幼胚)亞培養(yǎng)粒子轟擊后的細(xì)胞。